怎么用Excel制作标准曲线

首先，你得有靠谱的标准品，这是基石！浓度梯度也要设计好，至少五个点吧，浓度太少，那曲线肯定不准。别问我怎么知道的，血泪教训！然后，配制一系列已知浓度的标准溶液，这个必须精准啊，不然一切都是空谈。我当时用的是移液枪，每次都小心翼翼的，生怕吸错体积。现在想想，那时候真是稚嫩。

下一步，就是测量啦！用你的仪器，什么分光光度计、HPLC，都行。关键是读数要稳定，多测几次，取平均值。当时我做的是酶标仪，96孔板，一遍又一遍地读数，眼睛都花了。Excel表格上密密麻麻的数据，看着就头疼。

OK，数据有了，重头戏来了，打开Excel！

第一步，把你的浓度数据和对应的吸光度（或其他信号值）数据，分别输入到Excel的两列。别搞错顺序哦！我曾经就犯过这种低级错误，结果折腾了一晚上。

第二步，选中这两列数据，点击“插入”菜单，选择“散点图”，通常选“带平滑线的散点图”或者“只有数据标记的散点图”，看你喜欢哪种，目的就是展示数据的趋势。

Excel会给你画出一个丑陋的图，别慌！这才刚开始。

选中图表中的数据点，右键单击，选择“添加趋势线”。这里是关键！

在弹出的“设置趋势线格式”窗口中，选择最合适的趋势线类型。常用的有线性、指数、对数、多项式等等。选哪个？这取决于你的数据！如果数据点近似呈一条直线，那就选线性，简单粗暴。如果曲线弯曲，那就试试多项式，可以设置阶数，阶数越高，曲线越拟合，但也要小心过拟合。过拟合就是曲线把噪声也当成信号了，结果反而不准。

我的经验是，先用线性拟合试试，看看R平方值（决定系数）怎么样。R平方值越接近1，说明拟合程度越高。如果R平方值太低，那就换其他类型的趋势线试试。

重点来了！在“设置趋势线格式”窗口中，勾选“显示公式”和“显示R平方值”。公式就是你的标准曲线方程，R平方值就是拟合度。

标准曲线方程到手，你就可以用它来计算未知样品的浓度了。把未知样品的吸光度值代入方程，解出浓度，搞定！

当然，实际操作中，还会遇到各种问题。比如，数据点太分散，R平方值太低，怎么办？

首先，检查你的实验操作！是不是配错了标准溶液？是不是仪器有问题？是不是读数不稳定？

如果实验操作没问题，那就尝试剔除离群点。离群点就是那些明显偏离趋势线的数据点。但注意，剔除离群点要慎重，要有充分的理由，不能随意删除数据！

还有，浓度范围也很重要。标准曲线的线性范围是有限的。如果你的未知样品的浓度超出了线性范围，那就需要稀释或者浓缩样品，重新测量。

另外，做标准曲线的时候，最好做空白对照。空白对照就是不含标准品的溶液，用来扣除背景信号。

最后，也是最重要的一点，标准曲线不是万能的！它只能用来分析与标准品成分相似的样品。如果你的样品成分复杂，那可能需要更复杂的分析方法。

总而言之，用Excel制作标准曲线，就是一个不断尝试、不断优化的过程。需要耐心，需要细心，需要经验。但只要你掌握了基本原理，多做几次，就能熟能生巧。这玩意儿，就是个熟练工种！